Techniques Classiques

AUXANOGRAMME DU CARBONE

• Homogénéiser une suspension dense de la levure à étudier dans de l'eau stérile dans le milieu de base sans sucre, fondu et refroidi à 45°.
• Coiuler stérielement en boîte de pétri
• Laisser solidifier.
• Disposer stérilement les disques imprégnés de sucre à la surface du milieu, en cercle, régulièrement à 1,5 cm du bord. Six sucres sont en général testés :
• glucose - galactose - maltose - raffinose - saccharose
• Mettre 24 -48 heures à l'étuve à 30° ou à 37 °.
• L'utilisation d'un sucre manifestée par la croissance de la levure, se traduit par la formation d'un halo laiteux autour du disque correspondant.

AUXANOGRAMME DE L'AZOTE

La technique est identique utilisant un milieu sans azote, sur lequel on dépose à la pointe d'un vaccinostyle, une trace des sels à étudier - histidine, urée, asparaginase, NO₃K surtout

ZYMOGRAMME

• en milieu liquide : eau peptonée + réactif d'Andrade + sucre à 2 %

soit en tube de Hall (tube à étranglement avec bille de verre faisant soupape au-dessus de l'étranglement) soit en tube à essai avec bouchon de paraffine. Ensemencer sous la bille ou à travers le bouchon de paraffine.

• en milieu solide : gélose semi-molle + réactif d'Andrade.

• Faire fondre la gélose, refroidir à 45°, ajouter 20 gouttes d'une solution à 30% de chaque sucre à étudier. Homogénéiser.
• Laisser refroidir.
• Ensemencer par piqûre centrale allant jusqu'au fond du tube
• Incubation 48 heures ou plus à 30°

LECTURE

• noter pour chaque tube l'acidification du milieu, virage au rouge en profondeur
• la production de gaz : présence de bulles dans la gélose ou soulèvement de la bille ou du bouchon de paraffine.

Se reporter au tableau de référence pour le diagnostic d'espèce.

Galeries prêtes à l'emploi

• Mode opératoire
• Schéma
• Images

Lois des fermentations par les Levures LOIS DE KLUYVER-DEKKER

• Toutes les levures assimilent le glucose (sert de témoin pour la bonne exécution de l'auxanogramme
• Toute levure qui fait fermenter un sucre l'assimile nécessairement
• Toute levure qui ne fait pas fermenter le lucose, ne fait fermenter aucun sucre
• Toute levure qui fait fermenter le glucose, fait aussi fermenter le fructose et le mannose
• Auncune levure ne fait fermenter en même temps le maltose et le lactose